Минимальные подавляющие концентрации антибактериальных препаратов для штаммов Staphylococcus epidermidis, выделенных из содержимого трахеобронхиального дерева новорожденных детей

Введение

За последние десятилетия достигнут выдающийся прогресс в выхаживании глубоко недоношенных детей и новорождённых с тяжёлыми патологиями. Вместе с тем ведение данной уязвимой категории пациентов сопряжено с сохранением рисков развития инфекционных заболеваний [1]. Неонатальные инфекции занимают одно из лидирующих позиций в структуре смертности пациентов отделений интенсивной терапии новорожденных. В структуре нозологических форм неонатальные сепсис, вызванный коагулазоотрицательными стафилококками, занимает одну из ведущих позиций [2]. Результаты исследований, проведенных в Китае, демонстрируют изменения структуры этиологических агентов генерализованной инфекции неонатального периода, произошедшие за последнее десятилетие и свидетельствуют о росте числа антибиотикоустойчивых штаммов [3][4]. К представителям группы с высоким риском развития инфекционной патологии относятся недоношенные новорожденные. Именно для маловесных младенцев характерно обнаружение ассоциации микроорганизмов, выделяемых из различных очагов, а также смена этиологических агентов в процессе стационарного этапа выхаживания [5].

Так как преждевременные роды ассоциированы с инфекционной патологией репродуктивной системы матери [6], то в большинстве случаев новорожденные недоношенные дети получают стартовую эрадикационную антибактериальную терапию ампициллин сульбактамом [7] для предотвращения развития инфекционного процесса и профилактики возникновения его осложнений. Однако результаты микробиологического мониторинга и данные, полученные в ходе ранее проведенных исследований, свидетельствуют о широком распространении в педиатрических отделениях перинатальных центров метициллин резистентных стафилококков, устойчивых ко всем группам бета-лактамных антибиотиков [8]. В связи с вышеперечисленным существует необходимость ротации антибактериальных препаратов или использование их комбинаций для потенцирование антибактериального эффекта. Одним из антибактериальных препаратов, используемых в комбинации является гентамицин [8][9][7]. К препаратами глубокого резерва относятся ванкомицин и линезолид. Некоторые исследователи называют сочетание гентамицина с ванкомицинам даже более безопсным, чем с цефокситином для лечения инфекций, вызванных коагулозоотрицательными стафилококками, по причине того, что цефокситин относится к препаратам широкого спектра действия [8,9,7]. Гликопептидный антибиотик ванкомицин является основным для для лечения инфекций, вызванных метициллин резистеными стафилококками [10]. Staphylococcus epidermidis является представителем нормального микробиоценоза кожи человека, поэтому колонизация им недоношенного новорожденного ребенка, находящегося на стационарном этапе выхаживания, является типичным процессом.

Цель исследования: изучить изменения показателей минимальной подавляющей концентрации антибактериальных препаратов для штаммов Staphylococcus epidermidis, выделенных из содержимого трахеобронхиального дерева новорожденных детей, находящихся на этапе выхаживания в условиях стационара.

Материалы и методы

Проведение бактериологического исследования образцов биологического материала, доставленного в лабораторию, проводили в соответствии с СанПин 3.3686-21 «Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней». Посев осуществляли в тиогликолевую среду (ТУ 9398-040-78095326-2008, ФБУН ГНЦ ПМБ, Россия г. Оболенск). После детекции признаков бактериального роста высевали 10 мкл на питательные среды: Питательная среда для выделения стафилококков “Стафилококкагар”, для выделения стафилококков, Эндо (ФБУН ГНЦ ПМБ, Россия г. Оболенск) для выделения энтеробактерий и на кровяно-сывороточный агар (основа-Conda, Испания) с целью выявления гемолитической активности бактериальных штаммов. Видовую идентификацию чистой культуры, определение антибиотикочувствительности и установление значений МПК цефокситина, гентамицина, эритромицина, клиндамицина, ванкомицина проводили на бактериологическом анализаторе VITEK 2 compact (Bio Mérieux, Франция, входит в перечень оборудования ЦКП «Инновационный научно-лабораторный центр перинатальной и репродуктивной медицины» ФГБУ «НИИ ОММ» Минздрава России) согласно инструкции производителя с использованием карт VITEK 2 GP (идентификация) и AST-GP67 (определение антибиотикочувствительности). Для оценки статистической значимости отличий в доле резистентных штаммов из общего количества исследованных использовали Критерий Хи-квадрат с поправкой Йейтса. Для оценки статистической значимости уровня признака в сравниваемых группах бактерий использовали U-критерий Манна-Уитни.

Результаты исследования

Все тестируемые штаммы были устойчивы к цефокситину, что позволяет отнести их к метициллин резистентным вариантам. Это в свою очередь, определяет устойчивость к защищенным пенициллинам, амоксициллину клавуланату, ампициллину сульбактаму цефалоспоринам I-IV поколений. Значение минимальных подавляющих концентраций (МПК) гентамицина, клиндамицина, эритромицина и линкомицина для Staphylococcus epidermidis представлены в таблице 1.

Как видно из данных, представлено в таблице 1, зарегистрировано в 2022г 44,4% и в 2024г 87,5% штаммов Staphylococcus epidermidis, устойчивых к гентамицину, однако достоверных отличий в частоте их встречаемости не установлено (р=0,179), что объясняется малой численностью исследуемых выборок. Вместе с тем при сравнении МПК к гентамицину Staphylococcus epidermidis, выделенных из ТБД, установлено значимое увеличение показателей в 2024 году по сравнению с 2022 (U-критерий Манна-Уитни равен 7.5.; р<0,05). Из вышеизложенного следует, что при сохранении наметившейся тенденции использования антибактериальных препаратов, увеличении количества исследуемых штаммов и продолжительности периода наблюдений мы с большой долей вероятности отметим статистически значимое увеличение доли штаммов, устойчивых к гентамицину. При сравнении МПК к ванкомицину Staphylococcus epidermidis, выделенных из ТБД недоношенных новорожденных детей в 2022 и 2024 гг значимых изменений не выявлено (р>0,05). Все тестируемые штаммы были чувствительными к ванкомицину. При сравнении МПК к клиндамицину Staphylococcus epidermidis, выделенных в 2022 и 2024 гг значимых изменений также не выявлено (U-критерий Манна-Уитни равен 40.5, р>0,05). Доля устойчивых к клиндамицину штаммов Staphylococcus epidermidis составляет 44,4% в 2022г и 12,5% в 2024г, однако достоверных отличий в частоте их встречаемости не установлено (р=0,179).

Обсуждение

Антибиотикотерапия является неотъемлемой составляющей терапевтической тактики ведения недоношенных новорожденных детей в странах всего мира, при этом она характеризуется длительностью назначения. Антибактериальные препараты для эмпирической стартовой антибиотикотерапии могут отличаться как внутри конкретного государства, так и между ними. Такой подход к ведению стационарного этапа выхаживания недоношенных новорожденных детей порождает ряд существенных проблем и формирование таких побочных эффектов как некротизирующий энтероколит, системная генерализованная инфекция, вызванная представителями грибов рода Candida [11].

Доля устойчивых к гентамицину при анализе МПК штаммов, включенных в настоящее исследование составила от 44,4% до 87,5% за двухлетний период наблюдения. Одним из ключевых аминогликозид-модифицирующим ферментом для стафилококков является бифункциональный AAC(6’)-Ie/APH(2»)-Ia. Его значимость обусловлена как высокой частотой втсречаеомсти среди этих патогенов, так и широким спектром резистентности к антибактериальным препаратам указанной группы [12].

Учитывая широкую распространенность антибиотикорезистентных штаммов, ванкомицин продолжает оставаться одним из наиболее часто назначаемых антибиотиков для лечения тяжелых нозокомиальных инфекций у новорожденных [13].

Устойчивость к эритромицину 87,5% в 2022 и 100% в 2024г. исследуемых штаммов Staphylococcus epidermidis, не смотря на его безопасность в плане развития токсических осложнений со стороны различных органов и систем, не позволяют использовать его в качестве эмпирической терапии. Устойчивые к антибактериальным препаратам такие представители нормального микробиоценоза кожи и других нестерильных локусов человеческого организма, как штаммы Staphylococcus epidermidis рассматриваются как депо различных генетических механизмов резистентности, обеспечивающей устойчивость к антибиотикам нескольких химических групп [14].

Все перечисленное диктует необходимость снижение потребления антибактериальных препаратов для сохранение терапевтической эффективности имеющих в настоящее время антибиотиков.

Заключение

Таким образом, проведенный анализ антибиотикоустойчивости стафилококков, выделенных при бактериологическом исследовании содержимого трахеобронхиалного дерева демонтрирует увеличение МПК Staphylococcus epidermidis к гентамицину и высокий риск увеличения доли резистентных к данному антибактериальному препарату штаммов, подтверждает сохраняющийся терапевтический потенциал ванкомицина, антибиотика глубокого резерва для терапии врожденных и внутрибольничных пневмоний у недоношенных новорожденных детей.